2. Биологическая проба
Биологическая проба является чувствительным методом
обнаружения
легионелл в исследуемом материале. Для биологической пробы
используют
морских свинок весом 250 - 300 г, которые заболевают и
гибнут от
легионеллезной инфекции при внутрибрюшинном заражении
суспензией,
3 4
содержащей 10 - 10 клеток бактерий. Через 12 - 48 часов у морских
свинок
возникает лихорадочное заболевание с подъемом температуры до 39,5 -
41 °С,
прострацией и поражением глаз. При массивном заражении
исследуемого
материала морские свинки гибнут на 3 - 4 сутки; при
меньшей
инфицированности материала гибель затягивается до 5 - 8
суток. Срок
наблюдения за животными до 10 дней.
В большинстве случаев животные погибают от легионеллеза с характерными патологическими
изменениями. При вскрытии обнаруживается перитонит со скудным фибринозным экссудатом,
резкая гиперемия париетальной брюшины с инъекцией сосудов. Печень и селезенка увеличены с
фибринозным налетом на капсуле. В селезенке встречаются мелкие очаги некроза. Наиболее
характерным следует считать развитие пневмонии без резко выраженного инфильтративного
воспалительного процесса, некробиоз септальных клеточных элементов, нередко с некрозом
альвеолярных перегородок и без поражения крупных сосудов. Характерны также набухание и
десквамация мезотелия плевры.
В мазках-отпечатках из селезенки и легких при окраске по Романовскому - Гимза обнаруживают,
как правило, значительное количество легионелл, а при посеве на угольно-дрожжевой агар
десятипроцентной суспензии селезенки морских свинок в 0,05 М фосфатном буфере (pH = 7,0) через
48 - 72 часа появляется рост культуры. Если в отпечатках из органов присутствует малое число клеток
возбудителя (5 клеток в поле зрения микроскопа), то посев на среды может быть отрицательным. В
этом случае рекомендуется ввести 10-процентную суспензию селезенки морских свинок в желточные
мешки 5-, 6-дневных куриных эмбрионов в количестве 0,3 - 0,4 мл. Желточные мешки куриных
эмбрионов, погибших на 4 - 6 день после заражения (на 1 - 3 сутки эмбрионы погибают от
посторонней микрофлоры), содержат значительное количество возбудителя (50 - 100 клеток в поле
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
зрения микроскопа), выявляемого окраской по Романовскому - Гимза или прямой
иммунофлюоресценцией.
Поделитесь с Вашими друзьями: |