Исследования по разработке и стандартизации комбинированного антимикробного и регенерирующего препарата на основе лекарственного растительного сырья 14. 04. 02 фармацевтическая химия, фармакогнозия
Скачать 0.89 Mb.
|
- Навигация по данной странице:
- Научный руководитель
- Халиуллин Феркат Адельзянович
- ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы.
- Цели и задачи исследования.
- Практическая значимость.
- Основные положения, выносимые на защиту
- Связь з адач исследования с планами научных работ.
- Публикации.
- ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Обоснование состава лекарственного препарата «Дентос» с позиций
- Характеристика основных групп БАС, входящих в состав ЛП «Дентос» и обусловливающих его фармакологические эффекты
- БАС терпеноидной природы
|
На правах рукописи Шагалиева Наталья Рашидовна ИССЛЕДОВАНИЯ ПО РАЗРАБОТКЕ И СТАНДАРТИЗАЦИИ КОМБИНИРОВАННОГО АНТИМИКРОБНОГО И РЕГЕНЕРИРУЮЩЕГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Самара – 2012 Диссертационная работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации
доктор фармацевтических наук, доцент Авдеева Елена Владимировна
доктор фармацевтических наук, профессор Халиуллин Феркат Адельзянович доктор химических наук, профессор Онучак Людмила Артемовна
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Защита состоится «___» ___________ 2012 г. в ___ часов на заседании Диссертационного совета Д 208.085.06 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 443079, г. Самара, пр. К.Маркса, 165 Б. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России (г. Самара, ул. Арцыбушевская, 171). Автореферат разослан «____»____________ 2012 г. Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат фармацевтических наук, доцент И.К. Петрухина ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Инфекционно-воспалительные заболевания пародонта являются распространенным явлением среди широких слоев населения. По данным ВОЗ, воспалительными заболеваниями пародонта страдает до 95% взрослого населения земного шара и до 80% детей. В этой связи создание препаратов для стоматологической практики, предназначенных для лечения таких широко распространенных заболеваний пародонта, как гингивит, стоматит, глоссит является весьма актуальным направлением. Среди современных лекарственных средств (ЛС) указанной направленности преобладают лекарственные препараты (ЛП) синтетического происхождения, обладающие наряду с выраженным антимикробным действием и рядом недостатков, такими как высокая сенсибилизирующая активность, постепенное развитие резистентности патогенной и сапрофитной микрофлоры и другими побочными эффектами. С этой точки зрения, лекарственные препараты на основе лекарственного растительного сырья (ЛРС) обладают преимуществами: эффективностью, безопасностью, мягкостью и широтой терапевтического действия, минимальным риском развития аллергизирующего эффекта и возникновения резистентности у микроорганизмов (Киселева Т.Л. и др., 2008; 2010; Куркин В.А., 2007; 2009; Самылина И.А. и др., 2003; 2010). В то же время, ассортимент используемых в настоящее время лекарственных средств растительного происхождения является явно недостаточным и представлен, либо отечественными препаратами («Хлорофиллипт», «Ротокан», «Сальвин», «Настойка календулы», «Настойка эвкалипта» и др.), для которых не характерно комплексное воздействие на обсуждаемую группу заболеваний, либо импортными дорогостоящими комплексными препаратами («Стоматофит», «Мараславин», «Дентинокс», «Калгель», «Элюгель» и др.), не лишенными определенных недостатков. К таковым следует отнести следующие: отсутствие всего необходимого для эффективного лечения спектра фармакологической активности; вышеперечисленные ЛС не содержат оптимальный состав биологически активных соединений (БАС), сонаправленно действующих на патогенетические звенья заболевания и, соответственно, усиливающих целевой (например, антимикробный и противовоспалительный) эффект; способы получения, как правило, не являются оптимальными в плане экстракции, так как не позволяют исчерпывающе извлекать весь комплекс действующих веществ. В этой связи очевидна целесообразность разработки нового лекарственного препарата на основе направленной комбинации БАС нескольких видов ЛРС для обеспечения комплексного действия на инфекционно-воспалительный процесс в ротовой полости (в частности, заболеваний пародонта).
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: 1. Обоснование состава нового комбинированного лекарственного препарата «Дентос» на основе ЛРС. 2. Разработка способа получения лекарственного препарата «Дентос» (в форме сложной настойки). 3. Изучение параметров качества и обоснование подходов к решению вопросов стандартизации ЛП «Дентос» (сложная настойка). 4. Разработка методик качественного и количественного анализа для ЛП «Дентос» (сложная настойка). 5. Выбор оптимальной пролонгированной лекарственной формы (ЛФ) для разработанного лекарственного препарата и способа получения. 6. Адаптация методик анализа, разработанных для лекарственного препарата «Дентос» (сложная настойка), для стоматологического геля на его основе. 7. Изучение безопасности и специфической фармакологической активности (противовоспалительной, антимикробной, регенерирующей) нового лекарственного препарата «Дентос» в форме сложной настойки и в форме геля. 8. Изучение показателей качества нового лекарственного препарата «Дентос». 9. Разработка проекта фармакопейной статьи предприятия (ФСП) на ЛП «Дентос».
Предложен способ получения ЛП «Дентос» (в форме сложной настойки), предназначенного для применения в варианте полоскания (в результате микробиологических исследований достаточным является разведение 5:50). Для получения данного экстракционного препарата предложен метод модифицированной дробной ремацерации, позволяющий достичь эффективности экстракции на уровне 80-85% для основных групп БАС. Кроме того, по результатам проведенных технологических и фармакологических исследований была выбрана пролонгированная лекарственная форма - гель на основе натрий-карбоксиметилцеллюлозы (Na-КМЦ) с 15%-ым содержанием настойки «Дентос». При решении проблемы стандартизации комплексного препарата «Дентос» (в форме сложной настойки и в форме геля) с учетом содержания в нем различных по физико-химическим свойствам фенольных (фенилпропаноиды, флавоноиды, дубильные вещества) и терпеноидных соединений (эфирные масла, эуглобали, каротиноиды), применен многоуровневый аналитический подход к оценке содержания основных групп БАС при их совместном присутствии. Для обоснования показателей качества нового ЛП «Дентос» нами предлагается комплексный подход, подразумевающий применение адекватного набора аналитических методов, который заключается в последовательном определении суммы окисляемых веществ перманганатометрическим методом (фенилпропаноиды, простые фенолы, флавоноиды, дубильные вещества, некоторые терпеноиды) и рассматривается нами как интегральный показатель содержания действующих БАС и каждой конкретной группы действующих веществ с учетом их совместного присутствия: суммы фенилпропаноидов, суммы флавоноидов, суммы эуглобалей.
Изучены нормы качества и предложены методики качественного и количественного анализа основных групп действующих веществ ЛП в форме сложной настойки и в форме геля, отвечающие принципам гармонизации и унификации, предъявляемым к современному фармацевтическому анализу. В частности, титриметрическим методом (перманганатометрия) определяется сумма окисляемых веществ, методом прямой спектрофотометрии определяется сумма фенилпропаноидов в пересчете на кофейную кислоту, в варианте дифференциальной спектрофотометрии определяется сумма флавоноидов в пересчете на рутин, методом прямой спектрофотометрии в пересчете на ГСО эвкалимина и ВЭЖХ-анализа (в обоих вариантах - с использованием пробоподготовки) определяется содержание основных, отвечающих за антимикробную активность соединений - фенолальдегидов эвкалипта (эувимали). Результаты проведенных исследований нашли отражение в проекте ФСП «Дентос» (сложная настойка), который представлен на экспертизу в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского назначения» Минздравсоцразвития РФ (входящий № 10395 от 30.08.11 г.). Целесообразность дальнейших исследований по внедрению новых ЛП в медицинскую практику подтверждена результатами микробиологических исследований (установлен достоверно значимый бактериостатический эффект в отношении St. aureus, Kl. pneumonia, Candida, E. coli, St. haemolyticus, Ps. Aeruginosa) и фармакологических исследований (доказана выраженная ранозаживляющая и противовоспалительная активность, сопоставимая с синтетическим препаратом «Хлоргексидин» и имеющая преимущества перед растительным препаратом «Стоматофит» - действует в меньшей концентрации и не вызывает таких побочных эффектов, как появление нагноения и спонтанной кровоточивости. Результаты диссертационных исследований используются в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии и кафедре химии фармацевтического факультета ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России, (акты внедрения СамГМУ от 10. 05. 2011 г. и 19.10.11 г.), в ГБОУ ВПО НГМУ Минздравсоцразвития России (акт внедрения НГМУ от 26.10.11 г.) а также планируется к внедрению «Дентос» в форме настойки на ЗАО «Самаралектравы, «Дентос» в форме геля в ООО «Самара-фит» (акты внедрения от 11.10.2011 г. и 20.10.2011 г.). Основные положения, выносимые на защиту: 1. Обоснование состава нового комбинированного лекарственного препарата «Дентос» по данным химического состава и спектра фармакологической активности изучаемых видов ЛРС. 2. Результаты исследований по разработке технологического способа получения лекарственного препарата «Дентос» в форме сложной настойки и в форме геля. 3. Результаты исследований по обоснованию подходов к стандартизации комбинированного лекарственного препарата «Дентос» (сложная настойка) и разработке методик его качественного и количественного анализа. 4. Результаты исследований по адаптации разработанных методик качественного и количественного анализа сложной настойки к разработанному на ее основе гелю. 5. Данные по изучению безопасности и специфической фармакологической активности (антимикробной, регенерирующей и противовоспалительной). Связь задач исследования с планами научных работ. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России (№ Гос. регистрации 01200900658). Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на XIV и XVI Всероссийском конгрессе “Экология и здоровье человека” (г. Самара, 2009, 2011), конференции дипломированных специалистов Аспирантские чтения «Молодые ученые - медицине» (г. Самара, 2009, 2010, 2011), II Российском фитотерапевтическом съезде (г. Москва, 2010), научно-практической конференции «Актуальные вопросы стоматологии» (г. Самара, 2010), XVIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва, 2011). Выполнение фрагментов диссертационного исследования профинансировано по линии программы «Участник Молодежного Научно-Инновационного Конкурса – 2009» («У.М.Н.И.К.»), «У.М.Н.И.К. на СТАРТ» (Всероссийский Форум «Селигер-2010»: Тверская обл., о. Селигер, 2010) (Фонд содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере); областного конкурса «Молодой ученый – 2011». Публикации. Основное содержание диссертации опубликовано в 21 научных работах, из них 9 статей в журналах, рекомендуемых ВАК РФ. Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 148 страницах машинописного текста, содержит 19 таблиц, 31 рисунок. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания объектов и методов исследования (глава 2), обсуждения результатов собственных экспериментальных исследований (главы 3-6), общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 172 источника, из которых 37 - на иностранных языках. В Приложение вынесены акты внедрения, проект ФСП на ЛП «Дентос», патент РФ на изобретение, фрагмент лабораторного технологического регламента, протоколы исследования токсичности и специфической фармакологической активности. ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
зависимости «химический состав – фармакологический эффект» Основываясь на результатах многолетних фитохимических, аналитических, технологических и микробиологических исследований ЛРС и лекарственных препаратов, содержащих преимущественно БАС фенольной природы, проводимых на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии совместно с другими кафедрами медико-биологического профиля ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России, на основе систематизации литературного материала, а также собственных предварительных скрининговых исследований по определению выраженности и спектра антимикробной активности ряда видов ЛРС и их комбинаций, в пропись ЛП «Дентос» нами были включены пять компонентов. В состав отобранных видов ЛРС входят разнообразные группы БАС фенольной и терпеноидной природы. Это - эвкалипт прутовидный (Eucaliptus viminalis Labill., сем. Миртовые – Myrtaceae), эхинацея пурпурная (Echinacea purpurea (L.) Moench., сем Сложноцветные – Asteraceae), календула лекарственная (Calendula officinalis L., сем. Сложноцветные – Asteraceae), дуб обыкновенный (Quercus robur L., сем. Буковые – Fagaceae), гвоздичное дерево (Caryophyllus aromaticus L., сем. Миртовые – Myrtaceae). Выбор данного круга растений обусловлен комплексным подходом, который мы предлагаем для решения проблем, связанных с инфекционно-воспалительным процессом в слизистой оболочке ротовой полости. БАС вышеперечисленных растений оказывают сочетанное (в ряде случаев - синергетическое) воздействие на различные звенья патологического процесса, позволяя воздействовать как на причину возникновения заболевания (микробные агенты, снижение местного иммунитета), так и на последствия (отек, воспаление, разрыхление тканей слизистой, болевые ощущения). Данные виды лекарственных растений являются признанным источником для получения мягких и эффективных ЛП, обладающих антимикробным, противовоспалительным, иммуномодулирующим, ранозаживляющим, регенерирующим, вяжущим, антисептическим и дезодорирующим действиями. Спектр биологической и фармакологической активности основных групп БАС для указанных видов растений через призму зависимости «химический состав – фармакологический эффект» представлен в таблице 1. Высокая антимикробная активность, сравнимая с некоторыми антибиотиками, подтвержденная в ходе микробиологических экспериментов на базе кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, проявляется за счет эуглобалей эвкалипта (эувималь-1), эвгенола – основного компонента эфирного масла гвоздичного дерева, традиционно применяемого в стоматологической практике и обладающего мощным антисептическими бактерицидным действием. Противовоспалительное действие, усиливающее антимикробный эффект, обусловлено содержанием гидроксикоричных кислот (представлены кофейной, цикориевой и хлорогеновой кислотами эхинацеи и календулы), а также полифенольными соединениями дуба, флавоноидным и полисахаридным комплексом эхинацеи и календулы, сапонинами календулы и др. Мощное регенерирующее и ранозаживляющее действие, характерное для каротиноидного комплекса календулы, основным компонентом которого является β-каротин, дополняет антимикробный и противоспалительный эффекты и способствует ускорению процессов заживления и восстановления поврежденных тканей слизистой ротовой полости. Таблица 1
Основные эффекты (антимикробный, противовоспалительный и регенерирующий), в нашем случае они и являются целевыми, дополняются местным иммуномодулирующим действием (цикориевая кислота и другие производные кофейной кислоты, полисахаридный комплекс эхинацеи и календулы), что способствует восстановлению иммунитета на местном, локальном уровне. Вяжущее действие проявляется за счет полифенольного комплекса дуба – галловой, эллаговой кислот, катехина, входящими в состав гидролизуемых и конденсированных дубильных веществ, и обусловливает местный анестезирующий и противовоспалительный эффекты, усиливает местное анальгезирующее действие эвгенола и цинеола. Вышеперечисленные доводы нашли отражение в прописи состава ЛП «Дентос». Состав лекарственного препарата: Листьев эвкалипта 80,0 Коры дуба 40,0 Цветков календулы 40,0 Травы эхинацеи пурпурной 40,0 Спирта этилового 70% до получения 1 литра настойки Эфирное масло гвоздики 1, 0 мл
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
