Общий анализ крови
(трактовка результатов исследований, выполненных
на гематологических анализаторах)
Ю.В. Первушин, * С.А. Луговская,**, Л.А. Марченко*, В.Н. Иванова*
* ГОУ ВПО Ставропольская государственная медицинская академия Росздрава, кафедра клинической лабораторной диагностики ФПО,
**ГОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования, кафедра клинической лабораторной диагностики.
Сравнительно недавно только единичные клинико-диагностические лаборатории (КДЛ) имели возможность проводить гематологические исследования на автоматических анализаторах. Исследования крови выполняемые «ручными» методами имели большие погрешности, не было лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), в которых бы регулярно не высказывали претензий к качеству лабораторных исследований и, особенно, к исследованию крови. В настоящее время произошли кардинальные изменения. Многие крупные ЛПУ смогли оснастить КДЛ современными гематологическими анализаторами. В рамках приоритетного национального проекта «Здоровье» в КДЛ первичного звена здравоохранения поступили наборы лабораторного оборудования, включающие гематологические анализаторы. Таким образом, гематологические анализаторы появились - в городских, районных и детских поликлиниках, поликлинических отделениях центральных городских и районных больниц.
В настоящее время, рациональное использование лабораторного оборудования, поступающего в рамках Национального проекта, возможно, только при достаточной подготовленности врачей первичного звена здравоохранения и всех врачей клинических дисциплин к правильной трактовке получаемых результатов лабораторного исследования. Врачи должны ясно представлять себе:
-
возможности нового оборудования
-
трактовку результатов исследований,
-
те погрешности, которые могут возникать в процессе проведения анализа,
-
возмущающее влияние различных факторов (лекарственные препараты, лечебные процедуры, физические нагрузки, физиологические состояния и многие другие воздействия) на результаты лабораторных исследований.
Преимуществами автоматического анализа крови являются:
-
высокая производительность (до 100 и более проб в час),
-
небольшой объем крови (12-50 мкл),
-
оценка более 20 показателей, вместо 10-12 при обычном анализе крови,
-
внедрение в практику лабораторных исследований новых показателей, существенно расширяющих возможности диагностики,
-
графическое представление распределения клеток (гистограммы, скетограммы),
-
высокая точность исследования, так как подсчету подвергаются несколько тысяч клеток из одной пробы.
Оценивать результаты исследований крови, полученные на гематологическом анализаторе, необходимо в контексте с клиническими данными и состоянием больного. Следует помнить, что изменения клеточного состава могут наблюдаться, как при различных физиологических состояниях организма, так и вследствие проводимых лечебных и диагностических воздействий, оперативных вмешательств, лекарственного лечения, а также следует учитывать тяжесть процесса, реактивность больного, сопутствующие осложнения.
Контроль преаналитических факторов в гематологических исследованиях является ключевым для обеспечения качественных результатов тестов. Такие преаналитические характеристики, как взятие пробы, транспортировка и хранение образца, влияние лекарственных препаратов, а также факторы, связанные с подготовкой пациента, могут привести к неверным или неточным результатам анализов и, следовательно, к постановке ошибочного диагноза, что может повлечь за собой риск для здоровья пациента. Снижение числа ошибок на любой стадии преаналитического этапа может существенно улучшить качество гематологических анализов, снизить количество повторных проб и сократить расходы рабочего времени и средств, выделяемых на обследование пациентов. Одна из задач, стоящих перед врачом-клиницистом довести до сведения пациента правила подготовки к взятию крови и обеспечить правильность взятия крови процедурными медицинскими сестрами в отделениях.
При плановом назначении лабораторного теста кровь следует брать натощак (после примерно 12 ч голодания, воздержания от приема алкоголя и курения), между 7 и 9 ч утра, при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20—30 мин), в положении пациента лежа или сидя.
Лучшим материалом для клинического исследования крови является венозная кровь. Это обусловлено тем, что при известной стандартизации процессов взятия, хранения, транспортировки крови удается добиться минимальной травматизации и активации клеток, примеси других веществ (тканевой жидкости), при этом всегда имеется возможность повторить и/или расширить анализ (например, добавить исследование ретикулоцитов).
Взятие венозной крови облегчается применением закрытых вакуумных систем. Метод взятия крови с помощью закрытых вакуумных систем имеет ряд преимуществ, основными из которых являются обеспечение высокого качества пробы и предотвращение любого контакта с кровью пациента, а значит, обеспечение безопасности медицинского персонала и других пациентов.
Пункция кожи с целью получения капиллярной крови является процедурой выбора, если требуется взять небольшое количество крови. Для гематологических исследований капиллярную кровь рекомендуется брать в следующих случаях: при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента; при наличии у пациента мелких или труднодоступных вен; при выраженном ожирении пациента; при установленной склонности к венозному тромбозу; у новорожденных.
При трактовке результатов исследований проведенных на гематологическом анализаторе мы рекомендуем пользоваться принятыми в Российской Федерации нормами (табл. 1). Весьма желательно, чтобы во все гематологические анализаторы были введены именно эти показатели нормальной гемограммы.
Таблица 1.
Нормальные показатели периферической крови у взрослых
Показатель
|
Нормальные
значения
|
мужчины
|
женщины
|
RBC, эритроциты х 1012/л
|
4,0-5,0
|
3,9-4,7
|
HGB, гемоглобин, г/л
г/дл
|
130,0-160,0
|
120,0-140,0
|
13,0-16,0
|
12,0-14,0
|
НСТ, гематокрит,%
|
40-48
|
36-42
|
MCV, средний объем эритроцита, фл, мкм3
|
80,0-100,0
|
MCH, cреднее содержание гемоглобина
в эритроците, пг
|
27,0-31,0
|
MCHC, средняя концентрация %
гемоглобина в эритроците, г/л
|
30,0-38,0
300 - 380
|
RDW, ширина распределения RBC по объему
|
11,5-14,5%
|
Ретикулоциты,‰
|
2,0-10,0
|
WBC, лейкоциты х 109/л
|
4,0-9,0
|
Нейтрофилы, %,(109/л): палочкоядерные
сегментоядерные
|
1,0-6,0 (0,040-0,300)
47,0-72,0 (2,000-5,500)
|
Эозинофилы %,(109/л)
|
0,5-5,0 (0,020-0,300)
|
Базофилы %,(109/л)
|
0-1,0 (0-0,065)
|
Лимфоциты %,(109/л)
|
19,0-37,0 (1,200-3,000)
|
Моноциты %,(109/л)
|
3,0-11,0 (0,090-0,600)
|
Плазматические клетки
|
-
|
Тромбоциты х 109/л
|
180,0-320,0
|
СОЭ, мм/час
|
2,0-10,0
|
2,0-15,0
|
Само исследование крови в гематологических анализаторах имеет ряд особенностей. Так перед анализом вся кровь разделяется на две части.
Первая часть разводится дилюентом и происходит подсчет всех клеток содержащихся в растворе. Клетки объемом менее 30 фл подсчитываются и рассматриваются как тромбоциты, все остальные клетки – как эритроциты. Поскольку размеры лейкоцитов близки к размерам эритроцитов, разделить их не удается. При использовании кондуктометрических счетчиков в подсчет эритроцитов неизбежно будут входить лейкоциты. Таким образом, в анализе гематологического анализатора в графе эритроциты (RBC), практически оказывается сумма RBC и лейкоцитов (WBC). Однако, за исключением явных лейкоцитозов, их вклад будет чрезвычайно мал, так как в норме концентрация эритроцитов в крови на 3 порядка превышает концентрацию лейкоцитов.
Например, при содержании RBC 5 х1012/л и WBC 5х109л анализатор определит общее количество RBC – 5,005 х1012/л и ошибка составит всего 0,1%, что значительно ниже, чем ошибка самого прибора.
Только, при значительном увеличении числа WBC ошибка подсчета RBC прогрессивно нарастает, а при лейкоцитозе более 50*109/л может искажаться и показатель объема эритроцитов (MCV).
Ко второй части крови добавляется лизирующий реактив. Он вызывает полный гемолиз эритроцитов, после чего все подсчитанные клетки объемом более 35 фл идентифицируются, как лейкоциты. В этой же порции фотометрические определяется содержание гемоглобина (HGB).
Клиническое значение определения основных
показателей эритроидного ростка
Клиническое значение определения основных показателей эритроидного ростка – эритроцитов (RGB), гемоглобина (HGB) и гематокрита (HCT) давно и подробно описано и хорошо известно врачам-клиницистам, и потому на этих показателях подробно останавливаться не будем. Отметим только, что при определении на гематологическом анализаторе RBC возможны ошибки измерения.
Ложнозавышенные результаты анализа RBC наблюдаются при наличии в крови:
• гигантских тромбоцитов (с объемом более 30 фл);
• криоглобулинов
Ложное занижение результатов определения RBC может быть следствием:
• агглютинации эритроцитов;
• выраженного микроцитоза эритроцитов (тогда они воспринимаются аналиазатором,как тромбоциты).
Завышение результатов при определении HGB наблюдается при:
-
высоких лейкоцитозах (более 50х109/л);
-
гиперлипидемии;
-
гипербилирубинемии;
-
присутствии нестабильных гемоглобинов (Hb S, НЬ С);
-
криоглобулинемии.
Следует учитывать, что если нестабильные гемоглобины и криоглобулинемия встречается не слишком часто, то первые три пункта нередко могут существенно исказить результаты выполненного исследования.
Так в одну из больниц города Ставрополя в отделение интенсивной терапии поступила больная С-ва в тяжелом состоянии с выраженной гипергликемией и явлениями кетоацидоза. При исследовании гемограммы получен следующий результат:
Анализ ОИТАР-1 Время 10:16
Дата: 19/01/2007 С____ВА
Номер: 119
Т: 26.9 С
WBC : 22,1 H 103/mm3 ( 4,0 - 9,0) MCV : 89 μm3 (75 - 95)
RBC : 4,06 106/mm3 (3,9- 5,0) MCH : 52,2 H pg (24 – 34 )
HGB : 21,2 H g/dl (12,0-16,0) MCHC: 58,7 H g/dl (30,0-38,0)
HCT : 36,1 % (36,0 -48,0) RDW : 14,3 % (11,5-14,5)
PLT : 387 103/mm3 ( 150 - 400) MPV : 8 μm3 ( 7,4-10,4)
PCT : .311 % (.150- .400) PDW : 12,9 % (10,0-20,0)
WBC флаги : G1; G2
Диф. :
%LYM: 17,5 L % (19,0 - 37,0) #LYM: 3,8 H 103/mm3 (1,2-3,0)
%MON: 6,1 % (3,0 - 11,0) #MON: 1,3 H 103/mm3 (0,1-0,6)
%GRA: 76,4 H % (47,0-72,0) # GRA: 17,0 H 103/mm3 (2,0-5,5)
При оценке результатов обследования обращает на себя внимание не только чрезвычайное повышение HGB (до 212 г/л) и связанных с ним индексов MCH и MCHC (последний до невероятных величин), но и относительно нормальные показатели RBC и HCT. Все это бесспорно свидетельствовало об ошибке при определении HGB. Причиной ошибки явилась выраженная мутность («хилезность») сыворотки как следствие гипертриглицеридемии и повышения в сыворотке липопротеинов очень низкой плотности. Если бы в КДЛ не поступила кровь для биохимического исследования и не была бы получен сыворотка, вопрос о причинах ошибки мог бы остаться невыясненным. Аналогичные примеры можно привести и у больных с гипербилирубинемией – при желтухах различной этиологии.
НСТ в гематологических анализаторах не определяется, а рассчитывается, исходя из показателей RBC и MCV. Он представлен суммой прямо измеренных объемов эритроцитов в единице объема крови. Таким образом, не существует проблемы "остаточной" плазмы (плазмы оставшейся между эритроцитами при центрифугировании). Но именно поэтому результаты определения гематокрита методом центрифугирования (в гематокритной центрифуге, но не в пробирке – последнее запрещено!) и данные, полученные при исследовании гематологическим анализатором, будут отличаться. А, следовательно, для получения сравнимых результатов, желательно в процессе обследования пациента пользоваться каким-то одним из этих двух методов.
Кроме этого на результаты исследования HCT оказывает существенное влияние разведение крови изотоническим раствором, в котором эритроцит принимает оптимальный объем, отличающийся от того, который он имел в крови сосудистого русла. Существенные отличия будут в том случае, если у больного при взятии крови наблюдалось повышение или снижение осмотического давления плазмы (что нередко наблюдается у больных реанимационных отделений).
Возможные ошибки измерения.
Ложнозавышенные результаты HCT могут наблюдаться при:
-
криоглобулинемии;
-
присутствии гигантских тромбоцитов;
-
гиперлейкоцитозе (>50х109/л);
-
гипергликемии (> 33 ммоль/л или >600 мг/дл)
-
диабетическом кетоацидозе.
В двух последних случаях имеется гиперосмолярность плазмы. При разведении крови в анализаторе изотоническим раствором происходит быстрое набухание эритроцитов, что и вызывает завышение HCT. В этих случаях определение гематокрита методом центрифугирования более надежно.
К ложному занижению результатов HCT приводят агглютинация эритроцитов и выраженный микроцитоз (< 36 фл) эритроцитов.
ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ ИНДЕКСЫ
Широкое использование эритроцитарных индексов стало возможным только после выполнения исследований на гематологических анализаторах. Эритроцитарные индексы позволяют значительно повысить качество диагностики анемического синдрома.
MCV (mean corpuscular volume) - средний объем эритроцита, выражается в кубических микрометрах (мкм3) или в фемтолитрах (1фл = 1мкм3). MCV определяется большинством гематологических анализаторов. Вычисляется MCV делением суммы клеточных объемов на число эритроцитов.
MCV - это средний показатель объема всей популяции клеток. Поэтому необходимо иметь в виду, что MCV может иметь нормальное значение при наличии у пациента одновременно выраженного макро- и микроцитоза. В этом случае особую диагностическую важность приобретает анализ гистограмм.
MCV меняется в течение жизни: у новорожденных достигает 128 фл, в первую неделю снижается до 100-112 фл, к году составляет 77-79 фл, в возрасте 4-3 лет нижняя граница нормы (80 фл) стабилизируется. MCV у взрослых ниже 80 фл оценивается как микроцитоз, выше 100 фл, как макроцитоз.
Возможные ошибки измерения.
Ложное завышение MCV может происходить в случаях:
• присутствия холодовых агглютининов. Агглютинаты эритроцитов воспринимаются прибором как одна большая клетка, если их размер меньше верхнего порога эритроцитарного канала. Сохранение in vitro и измерение таких проб при 37°С способствует получению правильных результатов.
• диабетического кетоацидоза вследствие гиперосмолярности плазмы и быстрого набухания эритроцитов (увеличения объема) при разведении изотоническим раствором.
Относительное снижение MCV может быть при повышенном содержании фрагментов эритроцитов в крови вследствие механического гемолиза, коагулопатии потребления и других причин.
Клиническое значение. С клинической точки зрения этот показатель является важным абсолютным показателем. Этот показатель является более чувствительным, чем визуальная оценка диаметра эритроцитов, зависящая от формы клетки. Так изменение диаметра клетки на 5%, приводит к изменению MCV на 15%.
При трактовке анализа, следует учитывать, что:
-
ретикулоцитоз – увеличивает показатель MCV;
-
микросфероциты имеют диаметр меньше нормы, но при этом MCV чаще остается в норме;
-
MCV нельзя достоверно определить при большом количестве аномальных эритроцитов (например при серповидно-клеточной анемии; выраженном пойкилоцитозе);
-
при выраженном анизоцитозе эритроцитов, когда в крови присутствуют микро- и макроциты, MCV являясь средним показателем объема всей популяции клеток, может иметь нормальные значения.
В связи с этим при диагностике анемий абсолютно необходимо параллельно с исследованием индексов эритроцитов изучать мазки периферической крови и подробно описывать морфологию клеток.
MCV увеличен при макро- и мегалоцитарных анемиях, при анемиях после кровопотери, хронической гемолитической анемии, а также при алкоголизме, диффузных поражениях печени, гипотиреозе, диссеминированных злокачественных новообразованиях (метастазирование опухоли). Особенно высоки значения MCV при В12-дефицитных анемиях.
Нормальные величины MCV при нормоцитарных анемиях – анемии при хронических заболеваниях, апластические, гемолитические анемии, анемии после кровотечений. Кроме этого нормоцитозом могут сопровождаться миелодиспластические синдромы.
Снижение MCV характерно для микроцитарных анемий: прежде всего железодефицитной анемии, талассемии. Могут сопровождаться микроцитозом гемолитические анемии, гемоглобинопатии, иногда при гипертиреозе.
МСН (mean corpuscular hemoglobin) - среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг). Характеризует среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците в абсолютных единицах. МСН - более объективный параметр, чем устаревший цветовой показатель, который не отражает синтез гемоглобина и его содержание в эритроците.
Возможные ошибки измерения. Параметр МСН является расчетным, поэтому к ложнозавышенным результатам приводят все факторы, влияющие на завышение значений гемоглобина и занижение количества эритроцитов.
Ложнозаниженные результаты МСН получаются вследствие ошибок, связанных с неправильным определением числа эритроцитов (завышения их количества).
Клиническое значение. Изменения МСН лежат в основе разделения анемий на нормохромные (27-31 пг), гипохромные (< 27 пг) и гиперхромные (> 31 пг). Снижение наблюдается при железодефицитных анемиях, повышение – при макроцитарных и особенно мегалобластных анемиях.
МСНС (mean corpuscular hemoglobin concentration) - средняя концентрация гемоглобина в эритроците (г/дл; г/л; %). Показатель МСНС отражает степень насыщения гемоглобином эритроцита или соотношение содержания гемоглобина к объему клетки. Снижение значения МСНС наблюдается при заболеваниях, сопровождающихся нарушением синтеза гемоглобина. Увеличение же параметра МСНС выше нормальных значений свидетельствует об ошибках, допущенных при измерении данной пробы (погрешности определения гемоглобина или MCV), т.к. превышение концентрации гемоглобина выше определенного физиологического уровня привело бы к разрушению (гемолизу) эритроцитов, чего не наблюдалось в данной пробе. Таким образом, данный параметр может быть использован как индикатор ошибок, допущенных на аналитическом или преаналитическом этапах работы.
Возможные ошибки измерения. Поскольку параметр МСНС является расчетным, то к ложнозавышенным результатам приводит любая неточность, связанная с определением гемоглобина, эритроцитов, гематокрита, поэтому этот показатель может быть использован, как индикатор ошибки прибора (в т.ч. и гематологического анализатора) или подготовки пробы к исследованию. Уровень MCHC выше 38% является показателем необходимости повторения анализа или следствием грубой ошибки при его выполнении (см. пример с гипертриглицеридемией).
Нормальные величины колеблются от 30 до 38 % (г/дл) или 300-380 г/л. Повышение MCHC выше 38% встречается крайне редко (наследственный сфероцитоз).
Клиническое значение. В отличии от среднего содержания гемоглобина в эритроците, МСНС не зависит от среднего клеточного объема и является чувствительным тестом оценки нарушения синтеза гемоглобина.
Снижение показателя отражает абсолютную гипохромию и является характерным для железодефицитной анемии. Чувствительность MCHC при железодефицитных анемиях составляет около 85%.
Снижен показатель и при макроцитарных и особенно мегалоцитарных анемиях, т.к. увеличение объема эритроцита не соответствует увеличению в них концентрации Hb.
Низкие значения этого показателя при нормальном или слабо пониженном содержании гемоглобина в крови указывает на наличие гипотонии плазмы и увеличении объема эритроцита.
Поделитесь с Вашими друзьями: |