2. Эксперимент Альфреда Херши и Марты Чейз в 1952 г. Суть опыта: фаги, у которых белковая оболочка была мечена радиоактивной серой (S35), а ДНК - радиоактивным фосфором (Р32), инкубировали с бактериями. Затем бактерии отмывали. В смывных водах не обнаруживали Р32, а в бактериях - S35 Следовательно, внутрь попала только ДНК. Через несколько минут из бактерии выходили десятки полноценных фагов, содержащих и белковую оболочку, и ДНК.
Отсюда следовал однозначный вывод о том, что именно ДНК выполняет генетическую функцию - несет информацию как о создании новых копий ДНК, так и о синтезе фаговых белков.
4. Строение ДНК. Модель Уотсона-Крика.
ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота, гетерополимер, мономером является нуклеотид. В состав ДНК входит 4 разновидности нуклеотидов А-аденин, Г-гуанин (пуриновые), Ц-цитозин, Т-тимин (пиримединовые). Модель Уотсона-Крика «двойная спираль»:1.Молекула ДНК представляет собой две взаимопереплитающиеся полинуклеотидные цепочки закрученные. 2.Нуклеотиды соединяются друг с другом при помощи фосфодиэфирных связей. 3.При образовании двойной спирали 2 полинуклеотидные цепочки соединяются дру с другом при помощи водородной связи, действует принцип комплементарности А компл Т 2 водородные связи, Г комп Ц 3 вод. связи. 4.Две полинуклеотидные цепочки полярны и антиполярны 5штрих_____3штрих 3штрих___5штрих.
5. Основные физические св-ва ДНК
1. Денатурация - происходит при действии химических факторов (мочевина, гуанидинхлорид, кислота, щелочь) и физических факторов (температура). Денатурация при действии температуры – плавление ДНК.
Гиперхромный эффект – увеличение оптической плотности ДНК при плавлении ДНК. Максимальное повышение оптической плотности раствора ДНК при длине волны 260 нм приблизительно равно 80 %, при полном распаде ее до мононуклеотидов.
2. Гибридизация - возможна гибридизация между различными молекулами ДНК и между ДНК и РНК.
Гибридизация позволяет выявить родство различных ДНК. Чем ближе родство, тем выше степень гибридизации.
Этапы гибридизации
-плавление ДНК
-перенос на нитроцеллюлозной фильтр
-фильтр помещают в раствор анализируемой ДНК
-отмывка не связавшейся ДНК
-анализ результатов гибридизации
Поделитесь с Вашими друзьями: |