Введение чужеродных генов в клетки и контроль их экспрессии.
Плазмидные клетки вводятся вводятся в реципиентные клетки методом генетической трансформации (трансформация клеток кишечной палочки). В 1970г. Разработан метод введения ДНК в бактерии с использованием хлористого кальция для получения компетентных клеток. Метод электрофореза основан на принципе перемещения в электрическом поле веществ от одного полюса к другому со скоростью, зависящей от их размеров (позволяет следить за положением ДНК в геле). Отклонированную в векторах всю геномную ДНК или совокупность индивидуальных генов организма называют банком или библиотекой генов. Выделяют и очищают геномную ДНК из клеток организма, затем ее подвергают фрагментации с помощью рестриктаз, рекомбинантные молекулы затем клонируются. Банк может быть полным или частичным. Количество клонов зависит от размера генома и от величины фрагментов ДНК. Первый банк генов создан в 1976г. для кишечной палочки. Банки генов служат источником материала для изучения регуляции, структуры и функционирования генов и белков в организме. В 1969г. синтезирован ген алланиновой транспортной РНК дрожжей. В 1976г. синтезирован отрезок ДНК кишечной палочки, содержащий ген тирозиновой тРНК. Подходы к обнаружению и выделению генов: способ отбора на селективных средах, метод гибридизации с радиактивно меченным препаратом ДНК, для выделения генов также используются иммунологические методы, метод радиоиммунодитекции.
