Инструкция по определению тиамина (витамина b1) в пищевых продуктах

Утверждаю

продуктов.

витамином, используют флюорометрический метод. Он прошел широкую апробацию в различных

лабораториях научных и практических учреждений, принимавших участие в подготовке справочных

"Таблиц химического состава продуктов", рекомендован Междуведомственной комиссией по

составлению этих таблиц и одобрен Минздравом СССР.
Принцип метода
Тиамин в щелочной среде под действием железосинеродистого калия количественно окисляется

в тиохром, который в ультрафиолетовом свете обладает сине-голубой флюоресценцией (максимум

возбуждения при 365 нм и максимум флюоресценции при 436 нм). Интенсивность флюоресценции

тиохрома прямо пропорциональна содержанию тиамина. Освобождение связанных форм тиамина

достигают с помощью кислотного гидролиза и при воздействии протеолитических и фосфатазных

ферментов. Мешающие флюорометрическому определению соединения удаляют обработкой

изобутиловым спиртом или на колонках с ионообменными смолами.
Оборудование
Флюориметр ЭФ-3М или ФМ-Ц-2; потенциометр; термостат водяной на 37 °С; весы

лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 200 г, поверочной ценой

деления не более 0,5 мг; весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
взвешивания 500 г, поверочной ценой деления не более 50 мг; водяная баня.
Посуда
Ступка с пестиком; воронки фильтровальные диаметром 5 - 7,5 см; колбы мерные

вместимостью 100, 250 и 1000 куб. см; колбы конические вместимостью 100 и 250 куб. см; цилиндры

мерные вместимостью 250 куб. см; пипетки градуированные на 1, 2, 5 и 10 куб. см. Бюретка с креном

на 100 куб. см. Пробирки, цилиндры с притертыми пробками или делительные воронки

вместимостью 25 куб. см.
Адсорбционные колонки, состоящие из спаянных между собой концами трубок различного

диаметра и длины. Верхняя часть колонки имеет длину 9 - 10 см и диаметр 2,5 - 3,0 см, нижняя -

длину 15 см и диаметр 0,7 см и заканчивается краном.
Реактивы
1. Тиамина хлорид гидрохлорид (Гос. фармакопея СССР, X изд., ст. 674).
2. Калий железосинеродистый, х.ч.
3. Натрий гидроокись, х.ч.
4. Спирт изобутиловый, ч.д.а., с температурой кипения 180° или спирт бутиловый, ч.д.а., с

температурой кипения 117 °С. Проверяют спирты на отсутствие флюоресценции (измеряют

флюоресценцию спирта в сравнении с дистиллированной водой). Если спирты обладают сильной

флюоресценцией, то перед употреблением их очищают активированным углем или перегонкой на

глицериновой бане.
5. Натрий уксуснокислый 3-х водный, х.ч.
6. Кислота соляная, х.ч.
7. Калий хлористый, х.ч.
8. Аммиак водный, ч.д.а.
9. Спирт этиловый, ректификат.
10. Ферментные препараты амилоризин П10х или пектаваморин П10х.
11. Катиониты КРС ЗпТ-40, размер частиц 0,5 - 1,0 мм, или СДВ-3Т-40.