Принципы и методы выделения чистых культур (СС) аэробов


Идентификация бактерий по ферментативной активности



Скачать 17.57 Kb.
страница2/3
Дата30.04.2019
Размер17.57 Kb.
1   2   3
Идентификация бактерий по ферментативной активности.

Для индентификации бактерий-аэробов по ФА используют среды Гисса с углеводами. Под действием образующейся при расщеплении углевода кислоты индикатор (добавленный заранее) меняет цвет среды с жёлтого на красный. При этом Mb может расщеплять углевод до кислоты и газа, а может только до кислоты. Наличие газа устанавливают по скоплению его пузырьков в поплавке на жидких средах или разделению агарной среды воздухом в твёрдых средах.

В зависимости от результата (изменение окраса раствора обозначается К+, что означает "кислота"; накопление газа в поплавке обозначают Г+, что означает "газ". В отрицательных случаях обозначают К-, Г-):

Mb, расщепляющий сахар до кислоты (КС) и газа, биохимически активен (К+, Г+)


Mb, расщепляющий сахар до КС, неактивен (К+, Г-)
Mb, не расщепляющий сахар, инертен (К-, Г-)

Для протеолитической активности используют среды с желатином, молоком и пептоном. При использовании последней при расщеплении выделяются индол, аммиак и сероводород. Их выделение определяют с помощью установленных заранее индикаторов, которые меняют цвет при выделении этих газов. (Индол – покраснение, аммиак – посинение, сероводород – почернение).



Вывод: сахаро- и протеолитическая активность – диагностический признак для определения рода и вида.

Также изучают каталазную активность Mb.


На предметное стекло наносят 3% раствор H2O2 и добавляют исследуемую культуру, после чего наблюдают результат  разложение H2O2 до H2O и O2.

Вывод: каталазная активность определяет тип дыхания. При положительном результате в исследуемой культуре мы утверждаем о том, что это аэробы или факультативные анаэробы.

Для идентификации бактерий-анаэробов по ФА используют 3 среды:

1) ДДС – Вильсона-Блера для идентификации возбудителя газовой гангрены
На этой среде изучают сахаролитическую активность. В состав среды входит глюкоза, сульфат натрия, хлористое железо. Анаэробы восстанавливают сульфат натрия до его сульфида, после чего Na2S+FeCl22NaCl+FeS (чёрный осадок). При расщеплении глюкоза образуется газ.

2) ДДС – молоко (возб. газовой гангрены). В состав молока входят белок и молочный сахар лактоза.


Опыт 1  сбраживание молока с образованием сгустка (сахаролитические свойства)
Опыт 2  пептонизация молока с образованием губчатого сгустка и молочной сыворотки (протеолитические свойства).

3) Среда Цейсслера (кровяно-сахарный агар). Анаэробы обладают гемолитической активностью, они разрушают эритроциты, поэтому вокруг колоний образуется зона просветления.

Методы культивирования риккетсий и вирусов.

Для культивирования риккетсий и вирусов питательные среды не используются. Используются только биологические модели.

1) Куриный эмбрион – заражение проводят на хорион-аллантоис, желточный мешок или амнион. Признаки репродукции проявляются особенно чётко в месте заражения на хоорионаллантоисной оболочке в виде очагов поражения и геморрагий.

2) Культура клеток (тканей) – репродукция в культуре клеток сопровождается цитопатическим действием, которое проявляется в изменении морфологии клеток и их гибели. Характер и время проявления ЦПД зависит от вида Mb.

3) Лабораторные животные – репродукция сопровождается клиническими проявления болезни или гибелью животного.


Скачать 17.57 Kb.

Поделитесь с Вашими друзьями:
1   2   3




©zodomed.ru 2024


    Главная страница